1.OBJETIVO
El objetivo de este procedimiento es proporcionar la información necesaria para el manejo de las muestras biológicas asociadas a este nuevo agente etiológico, causante de un elevado número de casos de neumonía grave, de una manera segura, minimizando así los riesgos que conlleva. Hasta la fecha no está completamente claro el potencial patogénico del coronavirus SARS Co-2, ni su dinámica de transmisión, por lo tanto, es necesario mantener y fortalecer las medidas de bioseguridad y elementos de protección personal a la hora de manipular estas muestras. Para ello, se han seguido principalmente, las directrices y recomendaciones de la OMS/WHO – Organización Mundial de la Salud.
2.ALCANCE
El alcance de este procedimiento es servir de guía útil de actuación, para que el personal Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico (TSL) y de Anatomía Patológica – Citodiagnóstico (TSAP), en los Laboratorios de Análisis Clínicos, Bioquímica, Hematología, Laboratorio de urgencias, Microbiología, Inmunología, Anatomía Patológica, etc …, realice sus funciones minimizando riesgos y garantizando la calidad de los resultados, en casos de muestras sospechosas o portadoras de Coronavirus SARS CoV – 2.
3.EQUIPOS Y MATERIALES
3.1 Equipos de protección individual (EPI): Bata antifluidos, Mascarilla con válvula FFP2/FFP3, guantes antivirales desechables (UNE EN 374-5 2016), gafas de seguridad (protección ocular), gorro.
3.2 Centrifugadora con dispositivos de contención física apropiados (rotores de centrifuga adecuados, cubetas de seguridad para la centrifuga y rotores sellados) para la centrifugación
3.3 Cabina de seguridad biológica (BSC-II , o BSC-III, según Sección)
4.DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO
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Tfn: 966307033 – coptesscv@gmail.com – www.coptesscv.com
C /Periodista Rodolfo Salazar, no 20, Entresuelo, Pta. 2 (03012) Alicante.
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4.1 Fase Preanalítica: Pautas para el envío de las muestras.
Desde los Servicios peticionarios se enviarán las muestras para realizar las analíticas pertinentes. Una vez obtenidas las muestras y depositadas en sus respectivos contenedores, estos serán desinfectados externamente con las soluciones antisépticas adecuadas y se depositarán en doble bolsa. Previamente al envío de las mismas, deberán avisarnos telefónicamente. Las muestras confirmadas o con sospecha de infección por Coronavirus SARS CoV-2, nunca se enviarán por el tubo neumático, siempre se entregarán directamente al personal de laboratorio, informándole de la situación del diagnóstico del paciente. Así mismo, se habilitará algún tipo de “aviso” mediante código de color o numérico, en la petición del volante electrónico del análisis, por parte del Médico peticionario, para que quede registrado en el sistema informático del Laboratorio para su constancia como “protocolo de sospecha por Coronavirus SARS CoV-2”.
4.2 Recepción de las muestras. Consideraciones previas a su procesamiento. Contaminación por aerosoles.
Es recomendable que el procesamiento de las muestras se realice por parejas de TSL, uno de ellos se colocará el EPI y será el que las manipule, y el otro colaborará con él para evitar que contamine más de lo imprescindible la zona, en todo lo que requiera para realizar la tarea con seguridad.
El personal del Laboratorio que manipule muestras biológicas rutinarias o urgentes de pacientes con diagnóstico o sospecha de infección por SARS CoV-2, deberá seguir las pautas estándar y recomendaciones generales de bioseguridad establecidas para los laboratorios de nivel BSL-2. Los procedimientos con el potencial de generar aerosoles de partículas finas (preparación de las muestras con el tubo abierto, vorteado/agitación por vortex, sonificación de muestras en tubo abierto, etc…), deberán realizarse en una BSC de clase II. Los rotores deberán de ser cargados y descargados dentro de la misma. Deberá reducirse, en la medida de lo posible, todo procedimiento fuera de la cabina de seguridad. Cualquier procedimiento dentro del laboratorio, que pueda generar aerosoles y que se realice fuera de una BSC, deberá realizarse utilizando mascarilla FFP2 o FFP3.
Una vez comprobadas las muestras, se cotejará con el sistema informático del laboratorio – SIL (GestLab, etc…), el código de “prioridad” en la petición, para que el Facultativo Especialista/Residente y el Técnico Superior de Laboratorio (TSL), identifiquen fácilmente en el listado de peticiones, que el protocolo para sospecha de infección por Coronavirus ha sido activado en ese paciente.
4.3 Preparación y procesamiento de las muestras.
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-Muestras de procesamiento directo: sangre total para hemogramas se utilizarán dispositivos de entrada a los autoanalizadores o racks, destinados a ese tipo de muestras e identificados para que sean fácilmente localizables.
-Muestras que requieran preparación previa: siempre dentro de la cabina de bioseguridad.
* Gasometrías, se agitarán o purgarán dentro de la BSC antes de su procesamiento.
* Orinas para anormales y sedimento automatizados destaponar en BSC y procesar a continuación. Se procurará evitar, la lectura manual del sedimento urinario, si fuera necesaria se procederá como las muestras que citamos a continuación.
* Muestras para pruebas bioquímicas, de coagulación, inmunológicas… etc. (heces, sueros, plasmas, orinas y otros líquidos biológicos), las muestras que requieran centrifugación se cargarán en los dispositivos de la centrifugadora dentro de la BSC y se cerrarán con sus tapas de seguridad, comprobar que quedan bien cerrados. Tras la centrifugación, esperaremos a abrirlos en campana unos minutos para reducir la diseminación de aerosoles al destaponar, en el caso de no tener que procesar destaponado, poner en el dispositivo de entrada destinado a esas muestras directamente, que se encuentran en el interior de la BSC. En caso de no disponer de BSC, esperar siempre 15 minutos para abrir el contenedor de tubos de la centrifugadora, si no disponemos de contenedores de centrífuga, esperar siempre ese tiempo antes de abrirla. En el caso de manipulaciones diferentes a la centrifugación, siempre que sea posible dentro de la BSC.
4.4 Eliminación de las muestras y del material desechable. Descontaminación de la zona y del material reutilizable.
Una vez realizada la analítica, se deben seguir los protocolos de descontaminación, mantenimiento y eliminación de residuos utilizados habitualmente para otro tipo de microorganismo con riesgo de propagación y mecanismo de transmisión similar. Las muestras se considerarán residuos biosanitarios de clase III o especiales, tras su eliminación o conservación adecuada, se descontaminarán las superficies de trabajo y el equipo utilizado, según protocolos y/o normativa vigente, por productos desinfectantes apropiados, rayos ultravioleta…etc. Se recomienda seguir las indicaciones de la OMS y el ECDC para la dilución de uso (concentración), el tiempo de contacto y las precauciones de manejo.
5.RECOMENDACIONES ESPECIFICAS.
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5.1 Las siguientes actividades se pueden realizar en instalaciones BSL-2 utilizando prácticas de trabajo estándar para un laboratorio de nivel de bioseguridad BSL-2:
- × Examen anatomopatológico/histopatológico, y procesamiento de tejidos fijados con formalina o tejidos inactivados.
- × Preparación de placas para análisis molecular con ácido nucleico viral ya extraído.
- × Estudios de microscopía electrónica con rejillas o láminas fijadas conglutaraldehído.
- × Examen de rutina de cultivos bacterianos y fúngicos.
- × Tinciones de rutina y análisis microscópico de frotis fijados.
- × Empaquetado de muestras para su transporte a laboratorios de diagnóstico parapruebas adicionales.
- × Muestras inactivadas (p. Ej. muestras en tampón de extracción de ácidosnucleicos)Las siguientes actividades que implican la manipulación de muestras potencialmente infecciosas deben realizarse, como mínimo, en una cabina de seguridad BSC de Clase II. Se debe realizar una evaluación de riesgo específica del sitio para determinar si se precisan mayores precauciones de seguridad (por ejemplo, al manipular grandes volúmenes de muestra):
- · Alicuotar y/diluir muestras
- · Inactivación de muestras.
- · Inoculación de medios de cultivo bacterianos o micológicos.
- · Preparación y fijación química o térmica de frotis para análisis microscópico.
- · Realizar pruebas de diagnóstico que no impliquen la propagación de agentes virales in vitro o in vivo (preparación de láminas para Inmunofluorescencia, por ejemplo).
· Procedimientos de extracción de ácido nucleico con muestras potencialmente infectadas.
5.2 Por el momento, no se recomienda el aislamiento del virus en cultivos celulares ni la caracterización inicial de agentes virales a partir a partir de cultivos de muestras con SARS-CoV-2 para los laboratorios de diagnóstico rutinario, a no ser que se realice en un laboratorio de seguridad BSL-3.
5.3 Un paciente podría excretar Virus SARS CoV-2 en heces y/o orina sin tener resultados positivos en sus muestras respiratorias. Esto debe tenerse en cuenta a la hora de establecer las recomendaciones al alta.
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6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Directrices provisionales de bioseguridad de laboratorio para el manejo y transporte de muestras asociadas al nuevo Coronavirus 2019 (2019-nCoV). OMS – Organización Mundial de la Salud.
Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL) 5 th Edition CDC Laboratory Portal CDC (Internet)
Procedimiento de actuación frente a casos de infección por el nuevo Coronavirus (SARS – CoV – 2 ). Ministerio de Sanidad. Versión actualizada al 11 – 3 – 2020
WHO. Laboratory biorisk management for Laboratories handing human specimens suspected or confirmed to contain novel coronavirus: Interim recommendations. February 2013.